期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
降钙素基因相关肽对骨质疏松大鼠骨髓基质干细胞增殖及分化的影响
梁伟；李理；李兵
关键词：降钙素基因相关肽, 骨质疏松, 骨髓基质干细胞, 成骨分化
摘要：目的 观察降钙素相关基因肽(CGRP)对骨质疏松大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)增殖及成骨分化能力的影响,探讨其促进骨质疏松性骨折愈合的细胞/分子作用机制.方法 3个月龄SD大鼠,行双侧卵巢切除术,术后常规喂养,术后6个月用显微CT(Micro-CT)行骨密度检测,确定骨质疏松模型建立成功;处死骨质疏松大鼠,采用全血贴壁法分离BMSCs,用流式细胞仪进行鉴定;以培养基中加入不同浓度(10-7～ 10-10 mol/L)的CGRP建立实验组,用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖能力;碱性磷酸酶(ALP)活性检测及茜素红染色法观察CGRP对骨质疏松大鼠BMSCs成骨分化及细胞外基质矿化能力的影响;采用反转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测ALP、Ⅰ型胶原蛋白(COLL-1)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、骨粘连蛋白(Osteonectin)、Run家族转录因子(RunX2)等成骨相关细胞基因mRNA的表达;使用Western blot分析来检测RunX2及Osteonectin的蛋白含量.结果 成功分离培养出骨质疏松大鼠BMSCs;CCK-8法测定细胞增殖能力,CGRP各浓度组较对照组均增加,且呈剂量依赖关系,7d时对照组吸光度(A)值为0.5804±0.0150,CGRP组中10-7 mol/L为0.8041±0.029 9 (P=0.000),10-8 mol/L为0.788 6±0.028 0(P=0.000),10-9 mol/L为0.743 6±0.028 8(P=0.001),10-10 mol/L为0.6933 ±0.0292(P=0.004),差异有统计学意义;ALP活性测定结果显示,各CGRP组较对照组ALP活性均增高,14 d时对照组为4.633 ±0.423,CGRP组中10-7 mol/L为44.047±2.446 (P=0.000),10-8 mol/L为42.030±2.626(P=0.000),10-9 mol/L为39.333 ±0.527(P=0.000),10-10 mol/L为24.647±1.135(P =0.000)[单位:10-3μmol/(min·mg)],差异有统计学意义;钙结节染色均呈阳性,而对照组无显色;基因检测结果提示,各CGRP组的基因表达较对照组升高,7d时ALP空白组为0.999 5±0.205 0,10-7 mol/L为2.578 4 ±0.210 1 (P=0.001),10-10 mol/L为2.351 2 ±.0.201 2(P=0.001);BMP-2空白组为0.9795±0.200 1,10-7 mol/L为3.4279±0.255 2 (P=0.000),10-10 mol/L为2.9149 ±0.202 3 (P=0.000);COLL-Ⅰ空白组为1.029 5±0.202 2,10-7 mol/L为2.5187 ±0.2400(P=0.001),10-10 mol/L为2.347 8±0.201 4(P=0.001);RunX2空白组为0.9932± 0.2132,10-7 mol/L为2.4989±0.262 0(P =0.002),10-10 mol/L为2.2198 ±0.2503(P=0.003);Osteonectin空白组为1.019 5±0.200 1,10-7 mol/L为1.972 8±0.212 3(P=0.005),10-mol/L为1.8642±0.250 1(P =0.010),差异有统计学意义;蛋白检测结果提示各CGRP组的RunX2及Osteonectin蛋白表达较对照组均升高.结论 适当浓度(10-7～10-10 mol/L)的CGRP可以促进骨质疏松大鼠BMSCs的增殖,呈浓度依赖性,同时可提高其成骨分化能力,CGRP可能在治疗骨质疏松骨折的骨修复中发挥重要作用.
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