期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
节律基因BMAL1调控人软骨细胞胰岛素样生长因子1信号传导
李宁；刘鸣；刘宏建；李军伟；夏磊
关键词：Bmal1, 软骨细胞, 胰岛素样生长因子1, Ⅱ型胶原蛋白, 蛋白聚糖
摘要：目的 观察节律基因BMAL1对人软骨细胞中胰岛素样生长因子1(IGF-1)信号的调控作用.方法 人膝关节软骨细胞随机分为对照组、IGF-1组(100 ng/ml,12 h)、si-control+ IGF-1组、si-BMAL1+ IGF-1组、AG-1024组.IGF-1处理之前,si-control+ IGF-1组和si-BMAL1+ IGF-1组细胞分别先转染对照和靶向BMAL1的短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体,AG-1024组细胞添加10 nmol/L AG-1024预处理12 h.噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测BMAL1等蛋白的表达.结果 处理24h后,IGF-1组和si-control+ IGF-1组细胞活性高于对照组(0.293 ±0.018比0.248±0.018,P=0.000;0.285 ±0.015比0.248 ±0.018,P=0.000),AG-1024组则降低(0.182 ±0.009比0.248 ±0.018,P =0.000);48 h和72 h后,IGF-1组和si-control+ IGF-1组细胞活性高于对照组(48 h:0.422±0.023比0.342±0.027,P=0.000;0.405±0.026比0.342 ±0.027,P =0.000;72 h:0.508 ±0.029比0.411 ±0.026,P =0.000;0.506±0.025比0.411±0.026,P =0.000),si-BMAL1+ IGF-1组和AG-1024组则低于对照组(48 h:0.284 ±0.017比0.342 ±0.027,P =0.000;0.224 ±0.015比0.342±0.027,P=0.000,72 h:0.326±0.022比0.411±0.026,P=0.000;0.273 ±±0.013比0.411 ±±0.026,P =0.000) IGF-1组和si-control+ IGF-1组细胞凋亡率低于对照组[(4.5±0.6)％比(7.0±1.0)％,P=0.000;(5.1±1.1)％比(7.0±1.0)％,P=0.006],si-BMAL1+ IGF-1组和AG-1024组则升高[(13.4±1.4)％比(7.0±1.0)％,P=0.000;(14.7±1.1)％比(7.0±1.0)％,P=0.000].相比于对照组,IGF-1组和si-control+ IGF-1组磷酸化IGF受体(p-IGF-IR)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、Ⅱ型胶原蛋白(COLⅡ)、蛋白聚糖(ACAN)表达增加(IGF-1组:2.03±0.12比1.00±0.06,P=0.000;1.71±0.11比1.00±±0.07,P=0.000;1.54 ±0.10比1.00 ±0.05,P =0.000;1.96 ±0.11比1.00 ±0.05,P=0.000;2.12±0.16比1.00±0.04,P=0.000;si-control+ IGF-1组:1.95 ±0.06比1.00 ±0.06,P =0.000;1.65 ±0.12比1.00 ±0.07,P =0.000;1.52 ±0.11比1.00 ±0.05,P =0.000;1.91 ±0.11比1.00±0.05,P =0.000;2.06±0.13比1.00 ±0.04,P=0.000),AG-1024组则表达减少(0.73±0.06比1.00 ±0.06,P =0.000;0.77 ±0.04比1.00 ±±0.07,P =0.000;0.75 ±0.06比1.00 ±0.05,P=0.000;0.72 ±0.05比1.00±0.05,P =0.000;0.82 ±0.06比1.00 ±0.04,P=0.000);si-BMAL1+IGF-1组BMAL1 、p-Akt、p-ERK、COLⅡ、ACAN表达减少(0.37 ±0.04比1.00±0.06,P=0.000;0.88±0.09比1.00 ±0.07,P =0.015;0.82 ±±0.04比1.00±0.05,P=0.001;0.78±0.04比1.00±0.05,P =0.000;0.85 ±0.07比1.00 ±0.04,P =0.003).结论 沉默BMAL1的表达影响人软骨细胞存活、凋亡以及细胞内IGF-1信号传导.
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