期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
短发卡RNA介导的缺氧诱导因子-1α基因沉默对缺氧状态下骨肉瘤细胞增殖的影响
李阳；孙军
关键词：骨肉瘤, 缺氧诱导因子-1α, 基因沉默, 短发夹RNA
摘要：目的 观察缺氧环境对原代骨肉瘤细胞增殖的影响,以及用短发卡RNA (shRNA)沉默缺氧诱导因子(HIF)-1α基因后,缺氧状态下原代骨肉瘤细胞增殖的变化.方法 将原代骨肉瘤细胞分别置于缺氧环境(37℃、1％ O2、5％ CO2)或常氧环境(37℃、21％O2、5％ CO2)下培养,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期变化,Western blot检测HIF-1 α蛋白表达水平.其次,将HIF-1α基因及阴性对照基因(SCR)对应的shRNA由慢病毒载体介导转染原代骨肉瘤细胞,分别记为HIF-1 α/shRNA组和SCR/shRNA组,定量聚合酶链反应(qPCR)定量分析HIF-1αmRNA变化,Western blot检测转染后细胞HIF-1 α蛋白表达变化.后,转染后的细胞再次缺氧培养,采用MTT法检测细胞增殖.结果 细胞实验显示,缺氧环境可在一定时间(24 h)内抑制原代骨肉瘤细胞增殖,但随着缺氧时间延长抑制作用减弱,与常氧组比较,缺氧细胞12 h细胞增殖率减少30.5％,24 h减少25.0％.同时HIF-1α表达升高,表明肿瘤细胞增殖与HIF-1α之间明显相关.转染shRNA后,与空白对照组及SCR/shRNA组比较,HIF-1 α/shRNA组的HIF-1α mRNA相对表达量明显降低(P =0.000),HIF-1α蛋白表达下降(P=0.000),缺氧培养的细胞增殖受到抑制.结论 shRNA介导的HIF-1 α基因沉默可以有效逆转缺氧环境中HIF-1 α对骨肉瘤细胞增殖的促进作用,从而可能干预肿瘤发育和生长的进程.
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