期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
人重组真核表达质粒pIRES-骨形态发生蛋白-血管内皮生长因子165的体外转染对兔骨髓间充质干细胞成骨分化的影响
肖飞；焦竞；黄玉成；徐海军；左伟；王俊文
关键词：骨髓间充质干细胞, pIRES-骨形态发生蛋白2-血管内皮生长因子165质粒, 体外转染, 骨形态发生蛋白2, 血管内皮生长因子165
摘要：目的 观察人重组真核表达质粒pIRES-骨形态发生蛋白2(BMP2)-血管内皮生长因子165 (VEGF165)的体外转染对兔骨髓间充质于细胞成骨分化的影响.方法 以原代分离的兔骨髓间充质干细胞为研究对象,在脂质体的介导下将重组质粒pIRES-BMP2-VEGF165转染至细胞中,采用G418体外筛选稳转细胞株,且在mRNA和蛋白水平上分别检测转染效果.继续培养稳转细胞株,细胞分:空质粒pIRES组、pIRES-BMP2-VEGF165转染组以及成骨诱导剂组;采用Western blot分别检测培养7d和21 d后各组细胞Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)和骨钙素(OCN)蛋白表达水平;培养14 d后,采用Gomori改良钙钴法染色检测碱性磷酸酶活性;培养21 d后,采用茜素红法钙质染色检测各组细胞钙化结节情况.结果 与空质粒pIRES组比较,pIRES-BMP2-VEGF165质粒组细胞在mRNA和蛋白水平上均检测到骨形态发生蛋白2和VEGF165的表达;与空质粒组及成骨诱导剂组比较,重组质粒pIRES-BMP2-VEGF165组细胞Col Ⅰ和OCN蛋白的表达水平均显著提升(Col Ⅰ:0.597±0.040比0.230 0.020,P =0.000;0.597 ±0.040比0.457 ±0.035,P =0.005;OCN:0.433 0.038比0.083 ±0.021,P=0.000;0.433±0.038比0.350±0.036,P=0.046);碱性磷酸酶染色阳性区域占比均显著增加[(69.000±5.568)％比(18.333±3.056)％,P=0.000;(69.000±5.568)％比(43.333 ±5.508)％,P=0.002],钙化结节阳性区域占比均明显增加[(37.747±3.763)％比(1.587±0.972)％,P=0.000;(37.747±3.763)％比(19.330 ±4.033)％,P=0.008].结论 人重组真核表达质粒pIRES-BMP2-VEGF165成功转染至兔骨髓间充质干细胞,且与成骨诱导剂比较,重组质粒pIRES-BMP2-VEGF165对该细胞的成骨分化能力有更明显的促进作用.
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