期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
长寿保障同源基因2诱导Hepa1-6肝癌细胞G0/G1期阻滞的作用及其机制
杨小理；余云艳；欧阳旭红；向加林；程晓明；杨艳
关键词：长寿保障同源基因2, 原发性肝细胞癌, 细胞周期, 核转录因子κB亚基p65, 细胞周期蛋白D1
摘要：目的 探讨长寿保障同源基因2(Lass2)对小鼠肝癌细胞Hepa1-6细胞周期的影响及其机制.方法 将前期成功构建的pEGFP-Lass2采用脂质体转染法转染Hepa 1-6肝癌细胞48 h,流式细胞术碘化丙锭(PI)法检测各组(阴性对照、空载、实验组)细胞周期,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法和Westem blot法检测Lass2、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、核因子-κB (NF-κB) p65mRNA及蛋白相对表达水平,并Westem blot法检测核NF-κB p65磷酸化(NF-κB p-p65)表达水平;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖活性;为进一步验证且明确其机制,利用Hepa1-6细胞悬液肝内注射法,构建C57BL/6J小鼠原位肝癌模型,采用流体力学尾静脉分次加强注射裸质粒,转染后分别提取各组小鼠肝组织总RNA、总蛋白及核蛋白,FQ-PCR、Western blot法验证Lass2、Cyclin D1、NF-κB p65 mRNA和蛋白相对表达水平、NF-κB pp65磷酸化水平.结果 Hepa1-6肝癌细胞实验组Lass2 mRNA及蛋白相对表达水平较阴性对照组、空载组明显上调(mRNA:F=1 486.895,均P =0.000;蛋白:F=55.964,均P=0.000),细胞周期G0/G1期百分比明显增高(F=239.867,均P =0.000)、G2/M期和S期明显减少(FG2/M=13.462,PG2/M=0.003,0.005;Fs=46.207,均P=0.000),同时下调实验组NF-κB p65、Cyclin D1 mRNA及蛋白表达水平(mRNA:FNF-κB p65=29.993,Fcyc1inD1 =113.260,均P=0.000;蛋白:FNF-κB p65=17.679,P=0.003,0.002;FCyclinD1=176.357,均P=0.000),NF-κBp-p65蛋白磷酸化水平明显抑制(FNF-κBp.p65=33.817,P=0.000).结论 Lass2基因使肝癌细胞Hepa1-6的细胞周期阻滞于G0/G1期,其作用机制可能是通过抑制NF-κB的激活,下调Cyclin D1的转录与蛋白表达有关.
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