期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
特异沉默精子相关抗原9基因对前列腺癌PC-3细胞的影响
毛立军；丁猛；徐凯；曹航；刘宁；陈家存
关键词：前列腺癌, 精子相关抗原9基因, RNA干扰
摘要：目的 通过RNA干扰技术,特异沉默精子相关抗原9(SPAG9)基因的表达,观察其对前列腺癌PC-3细胞的影响,并探讨其机制.方法 构建SPAG9基因特异性短发卡RNA(shRNA)表达载体pGPU6-绿色荧光蛋白(GFP)-SPAG9,用Lipofectamine 2000 将pGPU6-GFP-SPAG9转染人前列腺癌PC-3细胞,以空质粒pGPU6-GFP及未转染的细胞作对照.转染后48h,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测SPAG9 mRNA表达,Western blot检测SPAG9蛋白表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞的增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞侵袭能力;Western blot检测特异沉默SPAG9后PC-3细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2、血管内皮生长因子(VEGF)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达,进一步分析特异沉默SPAG9基因对前列腺癌PC-3影响的可能机制.结果 酶切及测序结果表明质粒 pGPU6-GFP-SPAG9构建成功.转染pGPU6-GFP-SPAG9 48h 后,PC-3细胞SPAG9 mRNA、蛋白表达水平分别为1.96±0.16和0.39±0.05,显著低于空载体组(3.23±0.18和1.13±0.04)及空白对照组(3.08±0.12和1.25±0.05),与空白对照组、空载体转染组比较,差异有统计学意义(P=0.000);CCK-8结果表明:转染48h后,pGPU6-GFP-SPAG9组细胞吸光度(A)值为31.9±2.6,与空白对照组(48.1±2.8,P=0.016)、空质粒组(47.8±2.8,P=0.023)比较,差异有统计学意义;凋亡结果示:pGPU6-GFP-SPAG9组PC-3细胞凋亡率为(12.12±0.69)%,而空质粒组、空白对照组凋亡率分别为(6.43±0.31)%(P=0.020)、(5.19±0.33)%(P=0.014),与对照组比较,差异有统计学意义;Transwell侵袭实验结果显示,pGPU6-GFP-SPAG组侵袭细胞数为(91.01±5.5)个,而空白对照组与空质粒组侵袭细胞数分别为(165.3±6.6)个(P=0.007)、(161.3±6.1)个(P=0.009),与对照组比较,差异均有统计学意义.Western blot结果显示,与两对照组比较,pGPU6-GFP-SPAG9组PC-3细胞MMP-2、VEGF、Vimentin的表达下降,而E-cadherin 表达上调,差异有统计学意义(P=0.000).结论 通过 RNA干扰技术,特异沉默SPAG9基因可抑制前列腺癌PC-3细胞增殖和侵袭并促进凋亡,其机制可能是通过下调MMP-2、VEGF、Vimentin 的表达,上调E-cadherin表达.
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