期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
微小RNA-83a靶向作用对体外骨髓间充质干细胞诱导分化的影响及其机制
刘建坤；王强松；邓树才；孙桂明；赵合元
关键词：微小RNA-83a, 骨髓间充质干细胞, 增殖, 脱噬作用, 生物学功能
摘要：目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-83a表达对体外骨髓间充质干细胞(BMSC)的诱导分化和生物学功能的影响.方法 将实验分为3组:A组:PEF-miR-83a和PSV2neo共转染组;B组:未转染组;C组:PEF和PSV2neo共转染组.A组为实验组,B、C两组为对照组.按照说明书进行转染,加入400μg PmlG419筛选,经3周后形成阳性克隆,扩增培养,应用基因转录方法检测miR-83a表达对体外BMSC的抗分化作用和生物学功能的影响;通过免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测miR-83a在细胞中的表达,Real-time PCR测定转染后A549细胞中Ras、Raf、蛋白激酶B(Akt)和细胞外信号调节激酶(ERK) mRNA水平表达变化,并通过噻唑蓝(MTT)法、划痕实验、苏木素-伊红(HE)染色、显微镜等观察比较转染miR-83a的细胞的的迁移能力,诱导分化和形态学改变.结果 Real-time PCR和免疫组织化学检查结果证实转染后细胞中miR-83a稳定表达;阿辛兰染色结果:培养第7天,诱导分化组细胞内充满了大量的棕色特异性染色颗粒,未诱导分化组未见特异性染色颗粒.Real-time PCR结果:A组细胞Ras、Raf、Akt mRNA相对表达量分别为0.97 ±0.27、0.54±0.18和0.99 ±0.31,B组细胞为1.79±0.36、1.70 ±0.33和2.06±0.42,C组细胞为1.68±0.30、1.58±0.25和1.89±0.31.和B、C组比较,A组细胞中Ras、Raf和Akt mRNA水平显著降低(t=1.531、1.838,P=0.016、0.011).MTT结果表明随着miR-83a与细胞效靶作用时间延长,抑制率明显增强,作用24、48、72 h后,细胞的凋亡率分别为(23.49±4.64)％、(45.73±8.72)％和(59.25±13.16)％,不同作用时间比较差异有统计学意义(x2 =5.203、2.146,P=0.013、0.045).划痕实验结果显示:miR-83a转染的细胞迁移能力低于正常细胞.miR-83a作用于细胞24 h后,形态学观察细胞发生凋亡或坏死.结论 miR-83a转染对体外BMSC具有抑制分化和促进凋亡作用,它可能是通过抑制表皮生长因子受体(EGFR)和EGFRvⅢ信号传导通路中的RAS-RAF-丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和磷酸肌醇3激酶(PI3K)-Akt两条重要信号通路分子的活性来发挥作用.
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