期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
携带超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A基因低免疫原性病毒的构建
周蓓；胡建鹏；邵晨；崔飞伦
关键词：慢病毒, 金黄色葡萄球菌肠毒素A, 肿瘤, 超抗原
摘要：目的 构建具备表达超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因的低免疫原性慢病毒载体,以期发挥高效激活T细胞抗肿瘤作用.方法 应用聚合酶链反应(PCR)获取大小分别为851 bp的人端粒酶反转录酶(hTERT)-CMV启动子序列及774 bp的SEA目的基因,将目的基因构建到慢病毒载体质粒中,基因测序正确后,转入感受态细胞DH5α中扩增、收集.利用穿梭质粒和包装质粒共转染293FT细胞中包装病毒,超速离心浓缩法收集病毒上清液,荧光滴度法检测病毒滴度.感染复数(MOI)=10病毒上清转染膀胱肿瘤细胞BIU-87细胞株,收集PCR产物测序目的基因,Western blot法检测SEA基因表达.结果 载体质粒大小为10 458 bp,基因测序正确,无明显碱基突变.荧光滴度法检测病毒滴度为(4.30 ±2.00)×109 TU/ml.PCR产物测序目的基因证实目的基因正确,分光光度计检测24、48、96 h总RNA产物分别为742、803、726 mg/L.Western blot结果显示SEA基因成功表达.结论 成功构建携带超抗原SEA基因低免疫原性病毒.
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