期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
新型机械敏感性离子通道在软骨细胞凋亡中的作用机制
王天宝；李晓飞；冷萍；荣春；张钊；李晓东；张海宁
关键词：新型机械敏感性离子通道压电蛋白1, 软骨细胞, 骨性关节炎, 内质网应激, 凋亡, 机械牵张
摘要：目的 观察新型机械敏感性离子通道压电蛋白1(Piezo1)在骨性关节炎患者软骨细胞中的表达并探讨其在软骨细胞凋亡中的作用机制.方法 体外培养骨性关节炎患者退变软骨细胞,利用细胞体外加力实验系统(FX-5000 Tension System)处理细胞,根据预实验结果分成0h加力组(空白组)、2h加力组、12h加力组、24 h加力组、48 h加力组和相应的抑制剂红玫瑰毛蜘蛛来源刮刀样机械敏感毒剂4型(GsMTx4)组、抑制剂氟甲基酮(Z-ATAD-FMK)组.利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同力学条件刺激下各组细胞的Piezo1、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-12(Caspase-12)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、激活因子4(ATF4)和C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)的表达量.钙离子荧光探针(Fluo3-AM)试剂盒检测空白组,加力组和抑制剂组细胞胞质内的钙离子含量.膜联蛋白V-碘化丙锭(Annexin V-PI)凋亡试剂盒检测各分组的凋亡.结果 (1)Pizeo1 mRNA在骨性关节炎退变软骨中有少量表达,且12h加力组表达量增加,为51.21 ±7.42(采用2-△△Ct的方法无计量单位),24 h加力组达到高峰,为153.98±10.34,48 h加力组为73.98±14.01,与24 h加力组比较,Piezo1 mRNA的表达出现下降(P=0.013).内质网应激信号分子Caspase-12、PERK、GRP78、ATF4和CHOP的mRNA的表达也出现相同趋势.(2)2h加力组软骨细胞胞质中的钙离子较空白组有所增加,钙离子荧光强度由(226±25)nm增加到(481±19) nm,P =0.032,12h加力组钙离子浓度升高,荧光强度为(612±21) nm,24h加力组钙离子浓度达峰值,荧光强度为(1 009 ±29)nm,48 h加力组钙离子荧光强度为[(609 ±91) nm],48 h加力组钙离子浓度较24h加力组有所降低(P=0.017).(3)在牵张应力作用下,2h加力组早期细胞凋亡率为(0.214±0.091)％,较空白组开始增加(P=0.044),12h加力组晚期凋亡率为(0.258±0.115)％,较空白组开始增加(P=0.028),24 h加力组的晚期细胞凋亡率达峰值,为(0.587 ±0.214)％,但48 h加力组凋亡率为(0.231 ±0.218)％,较24h加力组有所降低(P=0.033).结论 机械敏感性离子通道Piezo1参与骨性关节炎的软骨细胞晚期凋亡过程,并且是以钙离子为第二信使,通过内质网应激通路启动细胞的凋亡过程.
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