期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
Smoothened基因靶向小干扰RNA慢病毒表达载体对人胰腺癌细胞生物学特性的影响
张波；易超；依马木买买提江·阿布拉；李海军
关键词：胰腺癌, Hedgehog信号通路, Smoothened基因, 小干扰RNA
摘要：目的 采用携带Smoothened (SMO)基因靶向小干扰RNA(siRNA)的慢病毒表达载体转染胰腺癌细胞后体外观察其对细胞生物学特性的影响.方法 依据前期研究方法合成3条携带SMO siRNA慢病毒表达载体(滴度:5×108、6×108、5×108 TU/ml),分别转染Patu-8988细胞后采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测细胞中SMO基因的表达并计算基因表达抑制率;筛选抑制率高干扰表达载体转染Patu-8988细胞72 h,采用噻唑蓝(MTT)实验检测细胞生长情况、流式细胞仪检测细胞凋亡情况、Transwell侵袭实验检测细胞侵袭转移能力、Western blot法检测通路靶基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)表达情况.结果 构建的3条SMO siRNA慢病毒表达载体对Patu-8988细胞SMO基因表达的抑制率分别为82.4％、93.1％及89.1％,选择抑制效率高的干扰载体转染Patu-8988细胞72 h后,细胞生长状况良好;与阴性对照组比较,转染组Patu-8988细胞第1天至第5天细胞生长抑制率分别为(7.46±0.32)％、(25.41 ±0.28)％、(25.94±0.51)％、(26.01±0.94)％及(43.23±0.88)％.;细胞凋亡率为(1.35±0.11)％低于对照组但可视为未发生显著凋亡(t=-4.523,P=0.011);转染组侵袭小室与Transwell小室细胞数分别为(38.00±4.73)个/高倍视野与(78.00±3.71)个/高倍视野,明显低于对照组[(128.00±10.91)个/高倍视野与(306.00±9.12)个/高倍视野;t=-22.808,P=0.000;t-69.256,P=0.000];转染后细胞内bcl-2蛋白的相对表达量为0.24±0.01明显下调(t=-27.386,P=0.000).结论 SMO siRNA慢病毒表达载体可有效阻断Hedgehog信号通路并显著抑制Patu-8988细胞的生长及其侵袭转移能力.
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