期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
丙酮酸激酶M2亚型在肾癌迁移侵袭中的作用及其机制
王新君；白培明；赵晓昆；罗广承
关键词：肾透明细胞癌, 丙酮酸激酶M2亚型, 迁移, 侵袭, 上皮-间充质转化
摘要：目的 探讨敲低丙酮酸激酶M2亚型(PKM2)对肾癌细胞株ACHN迁移侵袭的影响及其机制.方法 构建靶向PKM2基因的pLV载体,筛选稳定转染的细胞株.采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测敲低PKM2对ACHN细胞增殖的影响.在Transwell小室的上室和下室之间不放置基质胶测定细胞的迁移能力,在Transwell小室的上室和下室之放置基质胶测定细胞的侵袭能力.通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot的方法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的变化.结果 CCK-8实验结果显示敲低PKM2抑制了ACHN的增殖.对照组的葡萄糖消耗率和乳酸生成率分别为(3.493 ±0.179)和(3.553±0.185) nmol/106 cells/min,而shPKM2组的葡萄糖消耗率和乳酸生成率分别为(1.457 ±0.081)和(5.820±0.352) nmol/106 cells/min(P =0.001,P=0.005).Transwell迁移实验结果显示shPKM2组和对照组到达下室的细胞数分别为(62±6)个和(39±5)个(P=0.001).Transwell侵袭实验结果显示shPKM2组和对照组到达下室的细胞数分别为(40±7)个和(26±6)个(P =0.009).通过Western blot和RT-qPCR检测shPKM2组中E-cadherin蛋白和mRNA的相对表达量分别为1.560±0.110和2.534±0.342,而对照组中E-cadherin蛋白和mRNA的相对表达量分别为0.833 ±0.070和1.312±0.284(P =0.001,P =0.009),shPKM2组中Vimentin蛋白和mRNA的相对表达量分别为0.340 ±0.110和1.631±0.123,而对照组中Vimentin蛋白和mRNA的相对表达量为0.653±0.100和3.530 ±0.511(P=0.022,P=0.003).结论 敲低PKM2表达显著抑制了肾癌细胞的有氧糖酵解、增殖、迁移和侵袭能力,并影响了上皮-间充质转化(EMT)过程.
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