期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
腺病毒介导神经营养因子基因在骨髓间充质干细胞中表达及意义
黄成；吴朗；朱银圣；卢宏栩；吴颖；王静成；冯新民；杨建东
关键词：骨髓间充质干细胞, 胶质细胞源性神经营养因子, 分化, 神经元, 转染
摘要：目的 采用基因转染方法,以增强骨髓间充质干细胞(BMSCs)内源性胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因表达,观察BMSCs在内源性GDNF作用下分化.方法 分离、纯化大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定细胞表型分子.实验组以载鼠源性GDNF基因、绿色荧光蛋白(GFP)基因重组腺病毒(Ad-rGDNF-GFP)转染第3代BMSCs,即BMSCsrGDNF-GFP转染组,对照组分别为BMSCsGFP转染组、未转染组(BMSCsNull组).转染72 h后察各组中BMSCs对GFP的表达.荧光定量聚合酶链反应(qPCR)比较各组BMSCs对GDNF基因表达水平.噻唑蓝(MTT)法测定各组细胞活力.分别于转染后3、7d对比观察各组BMSCs形态变化,免疫荧光检测各组BMSCs对神经核蛋白(NeuN)及低分子神经丝蛋白(NF-L)的表达.结果 全骨髓贴壁法可获取梭形贴壁细胞,低表达表型分子CD11b(1.4％)、CD34(1.5％),高表达表型分子CD29(99.8％)、CD90 (95.6％);转染72 h后,BMSCsrGDNF-GFP转染组、BMSCsGFP转染组均表达GFP,未转染组无GFP表达;统计学分析qPCR结果表明BMSCsrGDNF-GFP转染组细胞GDNF基因表达水平高于BMSCsGFP转染组与BMSCsNull组,且差异有统计学意义;统计学分析MTT检测结果表明BMSCsrGDNF-GFP转染组细胞活力于转染后3d显著高于对照组.转染后3、7d,免疫荧光鉴定结果证实BMSCsrGDNF-GFP转染组中细胞表达NeuN、NF-L,并呈现出较为典型的神经样细胞形态,对照组细胞无NeuN、NF-L表达,且细胞基本维持原梭形形态.结论 Ad-rGDNF-GFP转染BMSCs增强细胞内源性GDNF表达后,BMSCs可向神经样细胞定向分化,并保持较高的细胞活力.
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