期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
神经胶质瘤致病因子-1在肾癌细胞株769-P体外侵袭活性强化中的作用及其机制
杨庆良；张海芳；张广云；周晨龙
关键词：肾癌, 神经胶质瘤致病因子-1, 小干扰RNA, 侵袭
摘要：目的 观察神经胶质瘤致病因子-1(Gli-1)在肾癌细胞株769-P细胞体外侵袭活性强化中的作用.方法 构建Gli-1-小干扰RNA (siRNA)慢病毒载体,将体外培养好的肾癌769-P细胞株分为3组:A组:Gli-1-siRNA和pGCL-绿色荧光蛋白(GFP)共转染组.B组:未转染组;C组:pGCL和pHelper 1.0共转染组.A组为实验组,B、C两组为对照组.应用基因转染方法,将A组肾癌769-P细胞转染Gli-1-siRNA慢病毒载体.检测Gli-1基因表达对肾癌细胞株769-P细胞的抗增殖作用和生物学功能的影响,通过Western blot和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测Gli-1-siRNA在769-P细胞中的表达水平,并通过噻唑蓝(MTT)法、划痕实验、流式细胞仪、显微镜等观察比较转染Gli-1-siRNA的769-P细胞的的迁移能力、黏附能力和凋亡等形态学改变.结果 (1)阴性对照组的Gli-1 mRNA表达量为98.2 ±6.6,Gli-1-siRNA转染组为53.8 ±4.6,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)阴性对照组的Gli-1蛋白表达量为94.9±7.9,Gli-1-siRNA转染组为42.6±3.2,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)划痕实验结果显示Gli-1-siRNA转染的769-P细胞株迁移能力低于正常769-P细胞株(P＜0.05).(4) MTT实验结果显示,Gli-1-siRNA对769-P细胞的活性抑制明显增强,相同作用时间不同比例之间差异有统计学意义(P＜0.05),同一比例不同作用时间之间差异有统计学意义(P＜0.01).(5)流式细胞术检测结果显示,B、C组769-P细胞12 h的凋亡率为(10.67±0.23)％和(6.84±0.16)％,A组细胞12h凋亡率为(45.40±5.79)％,24h凋亡率为(60.67±5.79)％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).(6)A组Gli-1-siRNA转染成功的769-P细胞其胞质内出现颗粒状物,肾癌细胞逐渐模糊、消失.24h后769-P细胞数明显减少,48 h后癌细胞大部分凋亡,细胞漂浮,并且在培养液中出现细胞碎片.B、C组769-P细胞状况良好,未见明显细胞减少.结论 Gli-1-siRNA可抑制肾癌769-P细胞中Gli-1的表达,降低细胞增殖率和侵袭能力,提示Gli-1可能在肾癌的恶性进展中发挥重要作用.
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