期刊简介

               中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊,国家科学技术部中国科技论文统计源期刊,中国生物医学核心期刊,中华医学会外科学分会两本会刊之一,以“探讨理论,更新知识,指导科研,服务临床”为办刊宗旨,其内容包括外科各个专业,是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来,本刊立足外科前沿,评论医学资讯,报道实验外科最新科技成果,内容新颖,信息量大,杂志被引频次与影响因子逐年增加,已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。                

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  • 杂志名称:中华实验外科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:1001-9030
  • 国内刊号:42-1213/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
中华实验外科杂志2016年第12期

沉默DNA甲基转移酶上调N-myc下游调节基因1表达对前列腺癌DU145细胞生物学行为的影响

李亚林;李丽;张一然;潘盼;刘冉录

关键词:N-myc下游调节基因1, DNA甲基化, DNA甲基转移酶, RNA干扰, 前列腺癌
摘要:目的 观察小于扰RNA(siRNAs)沉默DNA甲基转移酶(DNMTs)上调N-myc下游调节基因1(NDRG1)表达对前列腺癌DU145细胞生物学行为的影响.方法 使用siRNAs分别抑制DU145细胞中DNMT1、DNMT3b及DNMT1+ DNMT3b的表达;使用Western blot、实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中DNMT1、DNMT3b及NDRG1的表达改变;通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、Muse凋亡检测仪、划痕实验和Transwell侵袭实验,检测细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的改变;筛选上述改变显著组DU145细胞,抑制细胞中NDRG1表达,再次检测上述细胞生物学行为.结果 Western blot及RT-qPCR结果显示,与对照组比较,DNMT1抑制组、DNMT3b抑制组及联合抑制组的NDRG1 mRNA(1.59±0.03,1.23±0.01,1.36±0.11比0.90±0.15,1.00±0.03)和蛋白(1.07 ±0.16,0.49 ±0.01,0.92±0.09比0.23 ±0.04,0.30±0.07)表达显著增加(P<0.05).CCK-8结果显示,在24、48、72 h,DNMT1抑制组吸光度(A)值为0.189±0.030、0.266±0.048、0.419±0.058:DNMT3b抑制组为0.221±0.023、0.318 ±0.072、0.498±0.064;联合抑制组为0.199±0.021、0.284±0.062、0.488±0.091,与对照组比较,显著减少(P<0.05).凋亡检测结果显示,DNMT1抑制组凋亡率为(22.40±1.36)%、DNMT3b抑制组为(14.20±0.80)%、联合抑制组为(17.60±0.74)%,与对照组比较,显著增加(P<0.05).划痕实验结果显示,DNMT1抑制组划痕面积愈合率为(53.01±3.22)%、DNMT3b抑制组为(70.97±2.12)%、联合抑制组为(63.93±4.42)%,与对照组比较显著减少(P<0.05).Transwell实验结果显示,DNMT1抑制组侵袭细胞数为(16±3)个、DNMT3b抑制组为(32±5)个、联合抑制组为(20±4)个,与对照组比较,显著减少(P<0.05).其中,DNMT1抑制组效果显著(P<0.05),联合抑制未见显著协同效应.与对照组比较,NDRG1-siRNA可显著逆转由DNMT1-siRNA引起的DU145细胞生物学行为改变(P<0.05).结论 通过抑制DNMT1、DNMT3b在前列腺癌DU145细胞中的表达,可部分恢复NDRG1的表达,并可显著抑制肿瘤细胞增殖,促进细胞凋亡,减弱细胞迁移及侵袭能力,其中单独抑制DNMT1效果显著,联合抑制无明显协同效应,提示DNMT1可以成为前列腺癌去甲基化治疗的一个有效靶点.