期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
动态检测肺泡巨噬细胞自噬模型的建立
范涛；刘天舒；汪巍；张博友；胡浩；耿庆
关键词：肺泡巨噬细胞, 自噬
摘要：目的 建立动态检测肺泡巨噬细胞内自噬形成过程的细胞模型.方法 构建绿色荧光真核表达载体(PAsGreen2-N1-LC3),应用转染技术将该质粒导入大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383),筛选并获得稳定表达的细胞株.真核细胞中PAsGreen2-N1-LC3的表达分别用荧光显微镜、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot方法检测.结果 成功获得4株转染细胞株,荧光显微镜下观察NR8383 PAsGreen2-N1-LC3转染细胞株的绿色荧光率在90％[(92.25±2.45)％]以上.Western blot结果证实在加入等量自噬激活剂(雷帕霉素)培养后,实验组微管相关蛋白1轻链3(LC3)/β-肌动蛋白(β-actin)、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ均高于对照组(P＜0.01),运用RT-PCR技术检测转染细胞株的LC3基因相对扩增量是正常细胞LC3基因相对扩增量的5.188 611倍.结论 用含有PAsGreen2-N1-LC3真核表达载体转染NR8383细胞,经G418筛选,可成功建立能稳定表达PAsGreen2-N1-LC3基因的巨噬细胞株,并可对活细胞内自噬过程进行有效动态检测.
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