期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
携人血栓调节蛋白基因慢病毒载体的构建及其在内皮祖细胞中的表达
赵国峰；邓钢；侯居攀；吴志平；许荣睿；秦永林；金晖
关键词：血栓调节蛋白, 慢病毒, 内皮祖细胞, 基因表达
摘要：目的 构建携带人血栓调节蛋白(hTM)基因的慢病毒表达载体(plenti6.3-hTM-IRES-EGFP),体外转染兔外周血内皮祖细胞(EPCs),并观察其在EPCs中的表达及对其功能的影响.方法 采用DNA重组技术构建plenti6.3-hTM-IRES-EGFP慢病毒表达载体；密度梯度离心法分离兔外周血EPCs; EPCs分为实验组、病毒对照组及空白对照组；3组细胞分别转染plenti6.3-hTM-IRES-EGFP、pLenti6.3-MCS-IRES-EGFP及磷酸盐缓冲液(PBS)；流式细胞仪检测转染效率,转染72 h后激光共聚焦显微镜观察增强型绿色荧光蛋白表达,定量聚合酶链反应(Q-PCR)及Western blot检测细胞中hTM mRNA及蛋白表达；炭花青荧光燃料标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-ac-LDL)和异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素-1(FITC-UEA-1)双荧光法鉴定EPCs；噻唑蓝(MTT)法及Tr answell小室法检测各组细胞增殖及迁移活性.结果 成功构建plenti6.3-hTM-IRES-EGFP,转染EPCs 72 h后,绿色荧光蛋白表达率超过90.0％,流式细胞仪测定hTM阳性EPCs达92.9％,Q-PCR及Western blot显示转染组hTM mRNA表达明显高于对照组.3组EPCs的增殖及迁移活性比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 plenti6.3-hTM-IRES-EGFP慢病毒表达载体在EPCs中高效表达且不影响其生物学功能,为进一步研究hTM在动脉血栓疾病中的作用奠定了物质基础.
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