期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
抑制Pokemon蛋白表达对人肺癌细胞株NCI-H520的作用
袁坦；姜国忠；李宏云
关键词：Pokemon蛋白, 小干扰RNA, NCI-H520, 重组质粒, 增殖抑制
摘要：目的 利用RNA干扰(RNAi)技术将针对性构建的重组质粒转染入人肺癌细胞株NCI-H520,观察下调Pokemon基因对人肺癌细胞生物学行为的影响.方法 利用Ambion公司设计软件设计针对Pokemon基因的2条小干扰RNA(siRNA)序列,并合成2对互补的siRNA编码DNA片段,定向克隆至RNAi-Ready pSIREN-RetroQ载体的BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ位点,构建重组体质粒,分别命名为pSIREN-Pokemon-1和pSIREN-Pokemon-2,同时设立转染空载体对照组.Western blot检测人肺癌细胞中Pokemon蛋白表达,噻唑蓝(MTT)比色实验检测转染后细胞的增殖抑制结果,流式细胞分析技术检测转染后细胞周期的分布.结果 利用RNAi-Ready pSIRENR RetroQ载体构建的重组质粒可以成功抑制人肺癌细胞NCI-H520中Pokemon蛋白的表达.Western blot检测发现人肺癌细胞NCI-H520中Pokemon蛋白高水平表达,转染后其表达水平明显下降.转染后第3天,MTT比色实验显示pSIREN-Pokemon-1组(0.001 5 ±0.003 0)和pSIREN-Pokemon-2组(0.0086±0.0015)与pSIREN-Pokemon-0组(0.023 0 ±0.001 0)比较差异有统计学意义(P＜0.05),而pSIREN-Pokemon-1与pSIREN-Pokemon-2组之间差异无统计学意义(P＞0.05).流式细胞分析检测发现转染siRNA细胞与转染空载体细胞的细胞周期差异无统计学意义(P＞0.05).pSIREN-Pokemon-1转染组及pSIREN-Pokemon-2转染组形成克隆的数量(18.0±0.3、16.0±0.4)明显低于pSIREN-Pokemon-0组(52.0±0.4,P＜0.05).结论 使用pSIREN载体成功构建的重组质粒转染人肺癌细胞可有效抑制原癌基因Pokemon的表达.转染后细胞增殖受到抑制,生长速度减慢.抑制Pokemon蛋白表达对细胞周期无明显影响.靶向siRNA可以在人肺癌细胞中抑制Pokemon蛋白表达,负调节肺癌细胞生长.
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