期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
应用腺病毒载体系统构建1.3拷贝乙型肝炎病毒重组腺病毒载体
屈振亮；王西墨
关键词：肝炎病毒, 乙型, 腺病毒载体, 同源重组, 抗原检测
摘要：目的 应用腺病毒AdEasy系统构建含1.3拷贝乙型肝炎病毒(HBV)基因组的腺病毒载体,并鉴定目的蛋白的表达.方法 采用基因重组技术将4.1 kb的1.3拷贝HBV基因序列克隆在腺病毒穿梭质粒上,通过在大肠杆菌内与骨架质粒的同源重组,构建重组腺病毒质粒,经293T细胞包装后产生重组腺病毒,感染肝癌细胞后检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、HBV DNA和乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)蛋白的表达,以转HBV基因组的HepG2.2.15肝癌细胞株为对照,同时检测上述指标含量.结果 双酶切下的1.3拷贝HBV序列成功克隆在腺病毒穿梭质粒上,与骨架质粒同源重组后的腺病毒质粒转染293T包装细胞后产生了重组腺病毒,感染HepG2细胞后能在细胞培养上清中检测HBsAg和HBeAg的含量分别为70.70、5.50 IU/ml,HBV DNA含量为1.2×107 copies/ml.同期检测的HepG2.2.15细胞内HBsAg和HBeAg的含量分别为3.51、44.85 IU/ml,HBV DNA含量为7.4×104 copies/ml.Western blot检测可见被感染的HepG2细胞有HBX蛋白的表达.结论 应用AdEasy系统成功构建含1.3拷贝HBV基因组的重组腺病毒载体,经包装细胞产生的病毒感染靶细胞后能检测到HBV抗原的表达.
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