期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
重组腺相关病毒对内皮细胞增殖和凋亡的影响
翟慧；向阳；杨毅宁；马依彤；李晓梅；陈邦党；刘芬；张金宇
关键词：R65核酶基因, 腺相关病毒, 高脂血清, 增殖, 脱噬作用
摘要：目的 通过重组9型腺相关病毒(rAAV9)载体介导R65核酶基因对体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)进行转染,观察R65核酶基因表达对高脂血清刺激后HUVECs增殖和凋亡的影响.方法 体外培养HUVECs,高脂血清诱导建立动脉粥样硬化内皮损伤模型,重组rAAV9介导抗核因子(NF)-κB核酶基因(rAAV9-R65)腺相关病毒载体转染HUVECs.实验分为3组:(1)正常对照组;(2)高脂血清诱导组;(3)高脂血清诱导+病毒转染组.通过Western blot检测HUVECs细胞中p65核蛋白的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测NF-κB信号通路下游肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6的变化;Alamar Blue法检测rAAV9-R65转染后HUVECs的体外增殖;rAAV9-R65转染细胞96 h后流式细胞仪检测高脂血清刺激后HUVECs凋亡率的变化.结果 高脂血清诱导HUVECs 24 h后,细胞由卵圆形铺路石样逐渐变成类圆形,Western blot检测显示p65的表达水平分别为:空白组:0.0229 ±0.0024;高脂血清诱导组:0.224 3±0.008 6;rAAV9-R65转染+高脂血清诱导组:0.071 4 ±0.007 0.HUVECs细胞中高脂血清诱导后p65蛋白表达明显增高,而病毒转染后p65水平降低.ELISA检测结果显示HUVEC分泌的TNF-α水平3组分别为:15.98 ±0.43、27.94±0.83、19.73±0.43.而3组IL-6水平分别为:3.94 ±0.12、6.32 ±0.21、5.08 ±0.12.高脂血清诱导后TNF-α和IL-6的分泌显著高于空白组,而rAAV9-R65干预+高脂血清诱导后TNF-α和IL-6的浓度明显降低.Alamar blue法检测显示R65基因表达能明显减轻高脂血清刺激后HUVECs的增殖抑制.流式细胞术检测显示与空白组比较,高脂血清诱导后细胞早期凋亡比率为20.4％,晚期凋亡比率为4.7％;而rAAV9-R65转染+高脂血清诱导组早期凋亡比率降至7.2％,晚期凋亡比率降为2.9％,证明R65表达可明显减轻高脂血清刺激后HUVECs的凋亡.结论 R65基因表达能有效减轻高脂血清刺激后HUVECs的增殖抑制,并能抑制高脂血清诱导的HUVECs凋亡.
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