期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
甲胎蛋白抗原肽修饰的白细胞介素-15慢病毒表达载体的构建及鉴定
姜若愚；孙龙昊；李永元；何向辉；朱理玮
关键词：肿瘤基因治疗, 白细胞介素-15, 甲胎蛋白, 慢病毒载体
摘要：目的 构建甲胎蛋白(AFP)抗原肽修饰的白细胞介素-15(IL-15)基因慢病毒表达载体,包装慢病毒,体外感染人B细胞淋巴瘤细胞(BJAB)细胞,使之能够高效地表达甲胎蛋白抗原肽AFP158-166及IL-15,为体外大量扩增特异性T淋巴细胞建立实验基础.方法 通过聚合酶链反应(PCR)方法获得IL-15基因片段,定点突变方法在过渡质粒信号肽序列中插入AFP158-166表达基因,双酶切后克隆到第3代慢病毒载体pEZ-Lv201,酶切、测序鉴定正确后命名为CCS-afpIL15-Lv201.重组质粒与辅助质粒共转染293T细胞包装成慢病毒,体外感染BJAB细胞,ELISA检测IL-15的表达,液相色谱-质谱联用技术检测AFP抗原肽表达.结果 酶切、测序显示CCS-afpIL15-Lv201载体序列正确,制备成慢病毒感染BJAB细胞后,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-15的表达,24、48 h表达量分别为892.7 ng/L和1 232.6 ng/L.液相色谱-质谱联用技术检测到AFP抗原肽表达,其相对分子质量为1 204.65.结论 成功构建协同表达AFP、IL-15的慢病毒载体,并制备了具有感染性的慢病毒,实现了其在肿瘤细胞的高效表达.
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