期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
pRV-Display-NY-ESO-1真核表达质粒的构建及其在Myc-CaP细胞株中的稳定表达
谢冲；王国民
关键词：纽约人食管鳞状细胞癌抗原, Myc-CaP细胞, 重组质粒, 构建
摘要：目的 构建pRV-Display-NY-ESO-1真核表达质粒,建立并检测稳定表达纽约人食管鳞状细胞癌抗原(NY-ESO-1)的Myc-CaP细胞株.方法 从Genbank查找NY-ESO-1基因全长序列,聚合酶链反应(PCR)扩增目的片段,克隆至pDisplay载体,构建pDisplay-NY-ESO-1真核表达质粒,双酶切证实NY-ESO-1插入后,PCR扩增并定向连入pRV载体,构建pRV-Display-NY-ESO-1真核表达质粒,同时构建pDisplay-绿色荧光蛋白(GFP)作为阳性对照.经酶切、测序鉴定后,用Phoenix细胞产生逆转录病毒,脂质体转染法将重组质粒转入Myc-CaP细胞,并用Western blot和流式细胞术鉴定稳定转染的Myc-CaP细胞中NY-ESO-1的表达.结果 经PCR、测序鉴定成功构建pRV-Display-NY-ESO-1真核重组质粒.表达GFP的Phoenix细胞和Myc-CaP细胞在倒置荧光显微镜下均可见绿色荧光.Western blot检测Myc-CaP细胞中NY-ESO-1表达阳性,流式细胞术鉴定携带目的基因的Myc-CaP细胞纯度均大于80％.结论 pRV-Display-NY-ESO-1真核重组质粒稳定高表达于Myc-CaP细胞.
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