期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
门静脉注射小鼠铁调素基因特异性RNA干扰腺病毒的方法研究
朱志鹏；曾从丽；方向明
关键词：铁调素, 腺病毒载体, 门静脉, 基因治疗
摘要：目的 门静脉注射小鼠铁渊素(Hepcidin)基因特异性小发夹RNA(shRNA)重组腺病毒干扰载体,观察其对肝脏Hepcidin mRNA的干扰效果.方法 根据Genebank小鼠Hepcidin基因序列及相关文献,设计shRNA并合成1对互补的DNA单链寡核苷酸,退火后克隆至线性化pENTR/U6入门载体,以CMV-EGFP改造载体,利用Invitrogen公司LR重组系统与pAd/BLOCK-IT-DEST进行重组,构建pAD-U6-shRNA-CMV-EGFP腺病毒载体,转染293A细胞进行包装、扩增,获得腺病毒.实验组用BALB/C小鼠麻醉后行病毒门静脉注射,常规饲养10d后取成活小鼠肝组织,Trizol法提取RNA,半定量逆转录聚合酶链反应(Sq RT-PCR)法检测mRNA表达.另检测正常小鼠肝脏mRNA表达作对照.结果 经测序鉴定证实pAD-U6-shRNA-CMV-EGFP腺病毒载体构建成功,获得病毒的滴度为:2.7×109 ifu/ml.实验组Hepcidin基因相对表达量为1.30±0.53,明显低于对照组(6.39±1.00).结论 成功构建小鼠Hepcidin基因shRNA重组腺病毒干扰载体,其门静脉注射能够有效抑制目的基因表达.
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