期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
新型胰腺癌MUC1 DNA疫苗的优化构建及体外转染研究
吴文川；靳大勇；楼文晖；戎叶飞；王单松；秦新裕
关键词：胰腺癌, DNA疫苗, 细胞转染
摘要：目的 优化构建新型胰腺癌MUC1 DNA疫苗.方法 目的基因增加重复序列可变数目串联重复序列(VNTR),并分别插入乙型肝炎病毒(HRV)核心抗原基因(C1-144)和/或小鼠白细胞介素(IL)-18基因序列,插入真核表达载体pIRES2-EGFP,构建成优化重组质粒,酶切及测序鉴定.4种优化重组质粒分别体外转染2×106个293T细胞和Panc-02细胞,观察转染后48 h后绿色荧光表达,评估转染效率收集转染后的细胞,裂解后Western blot检测目的基因的表达,验证各优化重组质粒在真核细胞中的表达.结果 双酶切鉴定证实了pIRES2-EGFP-A-B插入了1100 bp大小片段,pIRES2-EGFP-A-C和pIRES2-EGFP-A-B-C重组质粒都插入了1200 bp大小片段,分别与目的基因大小一致.在转染转染后48 h后,293T和Panc-02均可见绿色荧光.Western blot检测可见在Panc-02细胞中pIRES2-EGFP-A-B质粒、pIRES2-EGFP-A-B-C质粒均可表达乙肝病毒核心抗原C1-144,pIRES2-EGFP-A-C质粒、pIRES2-EGFP-A-B-C质粒均可表达小鼠IL-18 (mIL-18).在293T细胞中,pIRES2-EGFP-A质粒、pIRES2-EGFP-A-B质粒、pIRES2-EGFP-A-C质粒、pIRES2-EGFP-A-B-C质粒均表达VNTR.结论 优化构建的4个重组质粒均可在真核细胞中表达插入的目的抗原.
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