期刊简介

               中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊,国家科学技术部中国科技论文统计源期刊,中国生物医学核心期刊,中华医学会外科学分会两本会刊之一,以“探讨理论,更新知识,指导科研,服务临床”为办刊宗旨,其内容包括外科各个专业,是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来,本刊立足外科前沿,评论医学资讯,报道实验外科最新科技成果,内容新颖,信息量大,杂志被引频次与影响因子逐年增加,已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。                

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  • 杂志名称:中华实验外科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:1001-9030
  • 国内刊号:42-1213/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
中华实验外科杂志2013年第06期

体外诱导可分解草酸成人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的研究

朱玮;袁坚;雷鸣;李舒珏;刘向崇

关键词:骨髓间充质干细胞, 细胞分化, 肝细胞, frc基因, oxc基因
摘要:目的 体外培养并转染了产甲酸草酸杆菌(Ox.F)草酸分解基因frc和oxc的成人骨髓间充质干细胞(hMSCs-frc-oxc),并诱导其向肝细胞分化.方法 体外培养转染了草酸分解基因的P4代hMSCs,并通过含40 μg/L肝细胞生长因子(HGF)± 10 μg/L胰岛素样生长因子(FGF)-4所组成的培养液诱导其向肝细胞分化.在分化过程中通过显微镜观察分化细胞形态变化.以实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)、Western blot技术和免疫细胞化学技术检测细胞内肝细胞特异标志物甲胎蛋白(AFP)、白蛋白(ALB)、细胞角蛋白-18(CK-18)和目的基因frc、oxc及其产物融合蛋白myc-FCOAT、flag-OCOAD的表达.成熟肝细胞L-02和转染了空病毒载体的hMSCs (hMSCs-vector)分别作为阳性对照组和阴性对照组.结果 可分解草酸的hMSCs-frc-oxc在体外可成功培养,细胞经上述培养液诱导后,细胞形态逐渐变短,变成多角形.Real-time PCR可检测在诱导组细胞中AFP、ALB、CK-18和草酸分解基因frc、oxc表达,而未经诱导细胞组AFP、ALB、CK-18则未表达,未转染目的基因的细胞组frc、oxc未见表达.免疫细胞化学检测诱导28 d后细胞可表达ALB,未经诱导细胞组ALB表达呈阴性.Western blot技术检测诱导第14、28天细胞中AFP、CK-18表达较未诱导组明显增加(P<0.05),与成熟肝细胞相似,并表达myc-FCOAT、flag-OCOAD,而未转染目的基因细胞组表达呈阴性.结论 含有草酸分解基凶的hMSCs-frc-oxc体外通过一定条件诱导可以向肝细胞方向分化,经诱导分化后细胞仍可成功表达frc和oxc基因及其产物.