期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
人骨骼肌成肌细胞体外分化的全程观察及INK4a信号通路对其衰老的诱导研究
赵丽霞；李蓉；熊东林；姚尚龙；廖翔
关键词：骨骼肌成肌细胞, 分化, 衰老, 信号通路
摘要：目的 建立入骨骼肌成肌细胞分离和纯化方法,展示人成肌细胞体外增殖分化至衰老的全过程；研究INK4a信号通路对其衰老的诱导.方法 采用机械法和胶原酶消化法,结合差速贴壁技术,获得高纯度的人成肌细胞,结蛋白(desmin)抗体染色鉴定,β-半乳糖苷酶染色及倒置显微镜下观察人成肌细胞生长、分化及衰老全程.构建慢病毒载体pLVX-p16INK4a,感染第3代入骨骼肌成肌细胞(p16组),采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法测定p16INK4amRNA水平,Western blot法测定蛋白水平；用β-半乳糖苷酶染色及倒置显微镜下观察鉴定细胞衰老程度.结果 desmin抗体着色表明分离得到的人成肌细胞纯度接近100％,获取了其增殖并分化为肌管、肌纤维以及终转归为衰老细胞各阶段的实验图片.转染7d后,RT-qPCR法与Western blot法证明p16组细胞p16INK4a mRNA与蛋白表达水平明显高于对照组(P＜0.05);p16组细胞镜下见明显衰老表型,细胞计数显著少于对照组(P＜0.05),胞质经β-半乳糖苷酶染色后有明显蓝染,而对照组胞质蓝染微弱.结论 人成肌细胞体外分离培养获得的不同阶段实验图景与现象分析,为以其为靶点的研究奠定了基础.INK4a信号通路的上调直接诱导了人成肌细胞的衰老.
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