期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
人血红素氧化酶-1基因pShuttle-CMV穿梭载体在Caco-2细胞株的表达及意义
刘玉林；陈广响；武继红；郭晓波；崔彬；张黎
关键词：血红素氧化酶-1基因, Caco-2细胞, 过表达载体, 肠黏膜屏障
摘要：目的 构建血红素氧化酶-1(HO-1)基因的真核过表达载体,观察转染人结肠癌细胞株Caco-2细胞后对其生长的影响和细胞定位.方法 构建人pShuttle-CMV-HO1载体,经测序、酶切鉴定正确后,采用脂质体转染法将载体转入Caco-2细胞中,经G418筛选并建立稳定过表达Caco-2细胞HO-1基因的细胞株.实验分为2组,分别为实验组(Caco-2-pS/HO-1)、对照组(Caco-2-pS),每组设3个复孔,应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法和Western blot法分别检测HO-1 mRNA和蛋白的表达水平；通过免疫荧光法观察HO-1分子在细胞内的分布；采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测HO-1基因过表达后对Caco-2细胞的增殖影响.结果 酶切及测序显示pShuttle-CMV-HO1载体构建符合预期.与Caco-2-pS组比较,Caco-2-pS/HO-1组细胞HO-1基因mRNA表达明显增加(63.55±0.86比3.66±0.36,P＜0.05),HO-1蛋白表达呈现相同趋势；对转染目的载体的细胞应用m-CY3标记的抗体进行免疫荧光实验,激光共聚焦显微镜观察到HO-1分子主要分布于细胞质与细胞膜；Caco-2-pS/HO-1组较Caco-2-pS组细胞增殖数量明显增加[(5.43±0.24)个比(3.25±0.25)个,P＜0.05].结论 成功构建HO-1基因真核过表达载体,HO-1蛋白主要表达于细胞膜及细胞质中,HO-1蛋白异常表达可以促进Caco-2细胞增殖,从而对体外肠黏膜屏障模型起到保护作用.
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