期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
一种大鼠肝癌干细胞的离心富集方法0.
王兴；刘卫辉；夏宁；张娟；杨建栋；王涛；尤楠；龚振斌；季茹；赵戈；窦科峰
关键词：癌, 肝细胞, 干细胞, 细胞分离
摘要：目的 建立一种富集大鼠肝癌干细胞的方法,并检测此种方法分离得到的细胞是否具有肿瘤干细胞的生物学特征.方法 二乙基亚硝胺(DENA)腹腔注射构建大鼠肝癌模型,两步胶原酶灌注法分离肝癌细胞并体外培养,Percoll连续梯度密度离心法将细胞分成4层,采用流式细胞仪检测各层细胞的肝癌干细胞表面标志上皮细胞黏附因子(EpCAM)、甲胎蛋白(AFP)的表达,并用实时-聚合酶链反应( Real-time PCR)验证EpCAM、CD133、AFP的mRNA表达.绘制生长曲线检测各层细胞增殖能力,Transwell小室检测各层细胞的侵袭能力.结果 Percoll离心所得4层细胞中,第3层细胞是富集肝癌干细胞多的一层,具有强的增殖能力.第3层细胞EpCAM与AFP阳性表达高,分别为( 84.50±8.31)％和(85.20±8.31)％,与其他各层比较,差异有统计学意义(P＜0.05).经Real-time PCR 验证,第3层细胞的EpCAM和AFP mRNA表达高,分别为(111.34±5.59)和(13.76±0.95),与其他各层比较,差异有统计学意义(P＜0.05),第3层的CD133表达为(17.16±0.42),与第2层、4层比较,差异有统计学意义(P＜0.05),但与第1层比较,差异无统计学意义(P＞0.05).侵袭实验可见第3层细胞穿透的数量多(92.750±4.432),与其他各层比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 利用Percoll 连续梯度密度离心法成功地富集了肝癌干细胞,经验证符合肿瘤干细胞生物学特性,为肝癌的靶向治疗、多重耐药等基础研究提供了确切的研究对象.
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