期刊简介

               中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊,国家科学技术部中国科技论文统计源期刊,中国生物医学核心期刊,中华医学会外科学分会两本会刊之一,以“探讨理论,更新知识,指导科研,服务临床”为办刊宗旨,其内容包括外科各个专业,是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来,本刊立足外科前沿,评论医学资讯,报道实验外科最新科技成果,内容新颖,信息量大,杂志被引频次与影响因子逐年增加,已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。                

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  • 杂志名称:中华实验外科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:1001-9030
  • 国内刊号:42-1213/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
中华实验外科杂志2012年第12期

Desmuslin基因逆转录病毒表达载体的构建及包装细胞株的建立

张远起;王文见;殷恒讳;肖颖;姜雨刚;朱峥嵘;王深明

关键词:Desmuslin, 载体构建, 逆转录病毒载体
摘要:目的 构建Desmuslin (DMN)基因的逆转录病毒表达载体,并建立其包装细胞株.方法 聚合酶链式反应(PCR)扩增DMN基因的全长编码框(约3700 bp),PCR产物(PCR-DMN)亚克隆至逆转录病毒载体pRetroQ-AcGFP1-C1,构建DMN基因的逆转录病毒表达载体pRetroQ-AcGFP1-C1-DMN,酶切及测序鉴定后,把重组质粒通过转染导入包装细胞株PT67,嘌呤霉素筛选后获得抗性克隆,293细胞进行病毒颗粒滴度测定.结果 pRetroQ-AcGFP1-C1-DMN克隆的酶切鉴定和测序鉴定结果表明DMN基因的全长编码框被准确克隆至载体pRetroQ-AcGFP1-C1,其序列与理论序列完全一致;获取了稳定产生DMN逆转录病毒的PT67细胞克隆株,其产生的病毒原液平均病毒滴度为(2.80±1.46)×106 cfu/ml.结论 成功构建了Desmuslin基因逆转录病毒表达载体并建立了其包装细胞株.