期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
小鼠富含半胱氨酸分泌蛋白-1原核表达载体的构建与表达
罗金；杨菁；徐望明；尹太郎；李星
关键词：半胱氨酸分泌蛋白-1, 原核表达, 质粒, 融合蛋白
摘要：目的 构建小鼠附睾富含半胱氨酸分泌蛋白-1(Crisp-1)基因的原核表达载体并在大肠杆菌中的表达.方法 从小鼠附睾组织中提取总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增实验所需的Crisp-1基因片段,将目的 基因克隆至原核表达载体pET28a(+)上,酶切和测序鉴定后,转化大肠杆菌ER2566,经IPTG诱导表达,表达产物经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法鉴定.结果 重组表达质粒pET28a(+)-Crisp1经双酶切后,得到2条大小分别为5369bp和660bp的片段,测序结果 证实克隆的基因序列与GeneBank中的Crisp-1序列相符.重组体转化大肠杆菌ER2566后,经IPTG诱导,可表达分子质量(Mr)为30×103的重组蛋白,与预期值相一致.IPTG诱导4h重组蛋白的表达量高.SDS-PAGE电泳显示表达蛋白主要以包涵体形式存在于胞质中.包涵体经纯化和复性后,Western blot实验表明所获得的重组蛋白具有较好的抗原活性.结论 成功构建重组蛋白Crisp-1,为进一步研究Crisp-1的功能奠定基础.
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