期刊简介

               中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊,国家科学技术部中国科技论文统计源期刊,中国生物医学核心期刊,中华医学会外科学分会两本会刊之一,以“探讨理论,更新知识,指导科研,服务临床”为办刊宗旨,其内容包括外科各个专业,是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来,本刊立足外科前沿,评论医学资讯,报道实验外科最新科技成果,内容新颖,信息量大,杂志被引频次与影响因子逐年增加,已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。                

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  • 杂志名称:中华实验外科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:1001-9030
  • 国内刊号:42-1213/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
中华实验外科杂志2009年第10期

荷载β-actin、GAPDH基因小干扰RNA的双调控增殖腺病毒的构建

关键词:磷酸甘油醛脱氢酶, 启动子, 条件增殖腺病毒, RNA干扰
摘要:目的 构建hTERT启动子调控的表达β-actin、GAPDH基因小干扰RNA(siRNA)的条件增殖腺病毒.方法 分别将β-actin-siRNA、GAPDH-siRNA的模板DNA克隆至质粒pGPH1/GFP/Neo,构建pGPHI/GFP/Neo-β-actin、pGPH1/GFP/Neo-GAPDH.以pGPH1/GFP/Neo-β-actin为模板,PCR扩增出β-actin-siRNA表达框并克隆进质粒pZHTERT,获得pZHTERT-β-actin;以pGPH1/GFP/Neo-GAPDH为模板,扩增出GAPDH表达框并克隆进质粒pZD55,获得pZD55-GAPDH.将pZHTERT-β-actin、pZD55-GAPDH重组,构建穿梭质粒pTD-GAPDH-β-actin,并与腺病毒右臂质粒pBHGE3共转染293细胞,9~12 d后出现病毒空斑,提取重组腺病毒的DNA、聚合酶链反应(PCR)鉴定正确者即为双调控增殖腺病毒TD-GAPDH-β-actin.扩增、纯化、测病毒滴度.结果 成功构建hTERT启动子调控的表达GAPDH、β-actin小干扰RNA的条件增殖腺病毒.病毒滴度为2×10~(11)PFU/ml.结论 成功构建了TD-GAPDH-β-actin,为研究双基因小干扰RNA靶向治疗肿瘤奠定了基础.