期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
人端粒酶逆转录酶启动子调控的重组腺病毒的构建及其在膀胱癌细胞中的表达
王亚轩；蔡文清；黎玮；杨书文；李景东；霍红旭
关键词：腺病毒载体, 膀胱癌, 基因治疗
摘要：目的 构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的腺病毒系统,观察其在膀胱癌细胞中的表达.方法 构建带有hTERT启动子的腺病毒穿梭载体pDC315-Tp-EGFP,细胞重组技术获得腺病毒Ad-hTERT-EGFP,按感染复数(MOI)100体外转染膀胱癌细胞株253J及人胚肺成纤维细胞株MRC-5,通过倒置荧光显微镜和RT-PCR分别检测EGFP的表达.带有小鼠巨细胞病毒(mCMV)启动子的腺病毒Ad-EGFP作为阳性对照.结果 成功构建出重组腺病毒Ad-hTERT-EGFP,滴度为3.8×10 10空斑形成单位(pfu)/ml,Ad-hTERT-EGFP感染的253J细胞中,(85.2±3.3)%发出明亮的绿色荧光;而其感染的MRC-5细胞未产生绿色荧光(P＜0.01);对照病毒Ad-EGFP在253J和MRC-5中分别有(87.1±2.2)%及(92.5±3.1)%的细胞可见到绿色荧光.RT-PCR检测显示:253J细胞转染Ad-hTERT-EGFP、Ad-EGFP后及MRC-5细胞转染Ad-EGFP后均有EGFP基因表达;而MRC-5细胞转染Ad-hTERT-EGFP后未见EGFP基因表达.结论 该腺病毒系统中hTERT启动子调控下游基因可选择性地在膀胱肿瘤细胞中表达,在正常细胞中不表达,具有明显的靶向性.
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