期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
针对K-ras基因点突变的反义寡核苷酸对人胰腺癌Patu 8988细胞的抑制作用
申咏梅；杨晓春；张梅花；石怡珍；孙亦晖；沈钧康
关键词：胰腺癌, 反义寡核苷酸, 基因突变
摘要：目的 检测人胰腺癌Patu 8988细胞K-ras基因点突变形式,并观察针对该点突变的硫代反义寡核苷酸在体内外对Patu 8988细胞增殖和凋亡的影响.方法 顺序特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)法和基因测序检测Patu 8988细胞K-ras点突变形式,根据点突变形式设计并合成硫代反义寡核苷酸(K-ras mutation ASODN)作用Patu 8988,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长情况;流式细胞术(FCM)检测K-ras蛋白表达和细胞凋亡;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测K-ras mRNA表达水平;以Patu 8988细胞建立裸鼠胰腺癌模型观察K-ras mutation ASODN在体内的抗肿瘤效果.结果 PCR-SSP法和基因测序检测表明Patu 8988细胞存在K-ras基因第12密码子点突变,其突变方式为GGT→GTT.体外实验表明K-ras mutation ASODN组较正义寡核苷酸(SODN)组、随机寡核苷酸(RODN)组和空白对照组可明显抑制Patu 8988细胞生长(P＜0.01),并呈时间-剂量效应关系;转染48 h后,K-ras mutation ASODN组的K-ras蛋白和mRNA表达程度较SODN组、RODN组和对照组均明显降低(P＜0.01),而细胞凋亡明显增多(P＜0.05).体内实验表明K-ras mutation ASODN较SODN组、RODN组和对照组能有效抑制BALB/C裸鼠人胰腺癌的生长(P＜0.01).结论 针对K-ras基因第12密码子点突变的反义寡核苷酸可明显抑制人胰腺癌Patu8988细胞生长,促进细胞凋亡,其机制可能是通过下调K-ras蛋白和K-ras mRNA表达而起作用.
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