期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊,国家科学技术部中国科技论文统计源期刊,中国生物医学核心期刊,中华医学会外科学分会两本会刊之一,以“探讨理论,更新知识,指导科研,服务临床”为办刊宗旨,其内容包括外科各个专业,是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来,本刊立足外科前沿,评论医学资讯,报道实验外科最新科技成果,内容新颖,信息量大,杂志被引频次与影响因子逐年增加,已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志

- 杂志名称:中华实验外科杂志
- 主管单位:中国科学技术协会
- 主办单位:中华医学会
- 国际刊号:1001-9030
- 国内刊号:42-1213/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
表达Ki67基因小干扰RNA的选择性增殖溶瘤腺病毒的构建
陈家存;郑骏年;毛立军;郑宏祥;郑典宝;刘俊杰;李望
关键词:RNA干扰, 腺病毒, 基因表达
摘要:目的构建表达肿瘤增殖基因Ki67小干扰RNA(Ki67-siRNA)的选择性增殖溶瘤腺病毒.方法设计有小发夹结构的Ki67-siRNA对应模板DNA序列,煺火处理后克隆至pCA13质粒,构建重组质粒pCA13-Ki67.用BglⅡ从pCA13-Ki67酶切出包含CMV启动子及Ki67-siRNA模板DNA序列的表达框,将此表达框克隆进选择性增殖腺病毒质粒pZD55,构建重组质粒pZD55-Ki67.将pZD55-Ki67与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染293细胞,9~12 d后出现病毒空斑.提取重组腺病毒的DNA,聚合酶链反应(PCR)鉴定正确者即为选择性增殖溶瘤腺病毒ZD55-Ki67.大量扩增,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度.结果成功构建了表达Ki67-siRNA的选择性增殖溶瘤腺病毒.结论成功构建的ZD55-Ki67为利用Ki67-siRNA靶向肿瘤治疗奠定了基础.
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