期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
腺病毒载体介导的Polo样激酶1短发夹环RNA对胶质瘤体内外增殖的抑制作用
姜晓兵；刘如恩；张方成；赵洪洋；朱贤立
关键词：RNA干扰, 胶质瘤, 腺病毒
摘要：目的 探讨重组腺病毒载体介导的Polo样激酶1(PLK1) 短发夹环RNA(shRNA)对人胶质瘤细胞株U251在体内外增殖的抑制作用.方法 设计并合成针对PLK1的shRNA,并克隆至真核表达载体pEGFP-H1上,再将H1启动子和shRNA亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack上,通过在携带有pAdeasy-1质粒的BJ5183细菌内同源重组,生成针对PLK1的shRNA重组腺病毒载体pAD-H1/PLK1,经293细胞包装产生重组腺病毒AD-H1/PLK1,感染U251细胞.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测U251细胞PLK1 mRNA表达,流式细胞仪检测细胞凋亡以及细胞G2/M期转变情况,以噻唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞的增殖活性.同时制备裸鼠U251细胞移植瘤模型并注射重组腺病毒,观察肿瘤生长情况.结果 成功构建针对PLK1基因的RNA干扰腺病毒表达载体,与AD-H1组比较AD-H1/PLK1组在转染24 h和48 h U251细胞PLK1 mRNA表达水平分别降低50.4%(P＜0.01)和71.9%(P＜0.01).且感染AD-H1/PLK1病毒48 h后的U251细胞凋亡率从8.3%升至65.6%(P＜0.01),而G2/M期的细胞从21.5%增至51.4%(P＜0.01),细胞的增殖能力则下降50%(P＜0.01).体内实验表明重组腺病毒载体介导的PLK1 shRNA也明显抑制肿瘤生长(P＜0.01).结论 腺病毒介导的RNA干扰技术可有效降低PLK1在胶质瘤细胞中的表达水平,抑制肿瘤细胞在体内外的增殖活性.
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