期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
外源性人胰岛素样生长因子-1基因在关节软骨细胞中的表达
张绍昆；刘一；吴宏；单玉兴；徐莘香
关键词：胰岛素样生长因子-1, 绿色荧光蛋白, 软骨细胞, 基因表达
摘要：目的探讨含有绿色荧光蛋白(GFP)的外源性人胰岛素样生长因子(hIGF)-1基因真核表达载体在关节软骨细胞内稳定表达的可行性,建立IGF-1基因工程化的关节软骨细胞.方法利用基因重组技术,将GFP cDNA片段插入pcDNA3.1-hIGF-1载体中,构建重组载体pcGI.然后采用脂质体方法,转染原代关节软骨细胞,经G418筛选后,继续体外单层培养4周.原位杂交和免疫细胞化学检测hIGF-1的表达,荧光显微镜观察GFP的表达,Ⅱ型胶原免疫细胞化学检测软骨细胞表型,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测软骨细胞增殖能力.结果根据重组载体pcGI内的酶切位点,设计采用BamH I酶切显示为线性化,Xba I酶切显示为512 bp、1 768 bp、5 915 bp三个片段,HindⅢ则酶切下3 023 bp、5 172 bp二个片段,证明所构建的质粒方向及大小正确,含有GFP和hIGF-1 cDNA片段.稳定转染pcGI的软骨细胞原位杂交、免疫细胞化学和荧光显微镜证实了hIGF-1和GFP的表达,同时MTT显示转染后的软骨细胞增殖能力增强,并能维持Ⅱ型胶原的表达.结论外源性hIGF-1和GFP基因在关节软骨细胞内获得稳定表达,体外单层培养的转染关节软骨细胞增殖能力增强,同时维持软骨细胞表型.
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