期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
人mdr1全长cDNA的克隆和pc-MDR1质粒的构建
韩宇；王颖；陈孝平；王家(马龙)
关键词：多药耐药基因, 质粒, 转染
摘要：目的从耐药肿瘤组织中进行mdr1 cDNA的全长克隆和pc-MDR1重组质粒的构建.并转hepG2细胞,快速诱导其耐药,并筛选其抗性克隆.方法设计单酶切位点引物,利用长距离逆转录-聚合酶链反应(Long RT-PCR)技术,hepG2耐药细胞扩增mdr1 cDNA,约3.8kb大小.将其插入至真核表达载体pcDNA3.0质粒中构建pc-MDR1诱导质粒,使其能够在真核细胞中表达P-糖蛋白(P-gp).转hepG2细胞,并用G418筛选出转染的细胞. 结果成功地扩增出3.8kb左右的mdr1 cDNA片段,经酶切鉴定、RT-PCR扩增特异片段和序列测序结果显示质粒构建初步成功,用G418筛选细胞耐药抗性克隆的时间约为14d.结论从耐药肿瘤组织中进行mdr1 cDNA全克隆和pc-MDR1诱导质粒构建的成功为快速诱导细胞耐药和进一步研究肿瘤细胞的耐药机制奠定了基础.
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