期刊简介
中华医学会主办。本刊是外科学类核心期刊，国家科学技术部中国科技论文统计源期刊，中国生物医学核心期刊，中华医学会外科学分会两本会刊之一，以“探讨理论，更新知识，指导科研，服务临床”为办刊宗旨，其内容包括外科各个专业，是紧密结合临床实践的全国实验外科专业刊物。设有“论坛”、“述评”、“实验研究”、“临床研究”、“新技术与新方法”、“动物模型”、“简报”、“综述”等栏目。创刊28年来，本刊立足外科前沿，评论医学资讯，报道实验外科最新科技成果，内容新颖，信息量大，杂志被引频次与影响因子逐年增加，已成为我国中高级外科医师学术交流的重要园地。
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首页>中华实验外科杂志
- 杂志名称：中华实验外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-9030
- 国内刊号：42-1213/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
风湿性心脏病肺动脉高压患者肺组织肾上腺髓质素受体mRNA的变化
方敏华；李桢；李强；朱家麟
关键词：风湿性心脏病, 肺动脉高压, 心脏病患者, 肺组织, 肾上腺髓质素受体, 杂交信号, 平均肺动脉压, 甘油醛脱氢酶, 电泳, 对照组, 作用机制, 异硫氰酸胍一步法, 探针, 面积, 磷酸, 甲醛, 灰度值, 缓冲液, 材料和方法, 真空转印仪
摘要：肾上腺髓质素是一种内源性神经肽，它参与了肺动脉高压的形成［1］，其作用机制之一是通过特异性受体发挥扩血管作用。我们采用印迹杂交(Northern blot)法检测风湿性心病肺动脉高压患者肺组织肾上腺髓质素受体(AM-R)mRNA的表达，以期探讨肾上腺髓质素在肺动脉高压中的作用机制。 一、材料和方法 1.标本来源：风湿性心脏病患者右肺组织18例，其中男11例，女7例，平均年龄31.7岁。根据平均肺动脉压分为3组［2］，每组6例：平均肺动脉压＜2.80 kPa(1 kPa=7.5 mm Hg)为肺动脉压正常组；2.80～5.33 kPa为肺动脉高压组；＞5.33 kPa为严重肺动脉高压组。正常对照组为无心肺疾病的患者右肺组织5例。 2.探针：人AM-R cDNA探针 (美国 Montuenga 博士惠赠)。 3.方法：(1)肺组织总RNA提取：采用异硫氰酸胍一步法。(2)RNA甲醛变性：取20 μg RN A，加入1×电泳缓冲液、体积分数为17.5%甲醛和50.0%甲酰胺，65 ℃水浴20 min，冰浴2 min。(3)RNA电泳：在质量分数为1%甲醛凝胶、1×电泳缓冲液中80 V预电泳5 min，65 V恒压电泳2 h左右。(4)转膜：采用真空转印仪，20×标准柠檬酸盐中负压400 MPa持续转印0.5 h。(5)Northern blot分析：将尼龙膜放入杂交炉中，55 ℃，转速12 r/min，预杂交4～6 h。再将用α-32P 3-磷酸核糖腺嘌啉标记好的AM-R cDNA探针，加入杂交管中，相同条件下杂交24～36 h。(6)杂交信号的密度扫描：放射自显影后，X光片经显影、定影、水洗、室温下凉干用计算机图像分析仪扫描分析，将各点杂交信号做面积和灰度测定，然后用同一样品3-磷酸甘油醛脱氢酶的杂交信号值做校正，即：AM-R mRNA(%) = (AM-R杂交信号面积×AM-R杂交信号灰度值)/(3-磷酸甘油醛脱氢酶杂交信号面积×杂交信号灰度值)×100%。 4.统计学方法：数据以均数±标准差(****±s)表示，进行方差分析。 二、结果 严重肺动脉高压组、肺动脉高压组、肺动脉压正常组肺组织AM-R mRNA分别为(76.00±1 1.50)%、(97.26±5.79)%、(105.41±12.24)%，合并肺动脉高压组 AM-R mRNA表达明显低于正常对照组(119.31±16.29)%(P＜0.05)，肺动脉压正常组 AM-R mRNA表达与正常对照组差异无显著性(P＞0.05)，严重肺动脉高压组AM-R mRN A表达明显低于肺动脉压正常组(P＜0.05)。
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